【豬精液密度測量】用先進儀器取代傳統血細胞計數板

  正目前豬人工授精已經廣泛開展,但一些種公豬站(場)對豬精子密度的測定還采取目測評估方法,生產出來的精液產品質量不穩定,在一定程度上影響了人工受精的效果。傳統的通過顯微鏡觀察,采用血細胞計數板檢測精子密度方法操作不便,計數受人為因素影響,很多豬場難以操作。因此,采用一種簡便、迅速、可靠的密度檢查方法就成為當前人工授精技術的迫切需求。  

一、國家標準

2009年國家頒布的《中華人民共和國國家標準種豬常溫精液[GB23238-2009]》中規定了豬原精液和常溫精液產品的指標和要求。

1、原精液

種豬原精液品質有如下5項指標和要求：

表1  原精液檢測指標要求

2、精液產品

種豬精液產品的品質有如下6項指標和要求：

表2  種豬精液產品指標要求

二、精液精子數測定

1、 傳統原精液精子數測定方法 

傳統原精液精子數量可使用 血球計數板和顯微鏡 測定。

用血色素微量吸管，準確西區50μL（0.05mL）豬原精液，鍵入到盛有準確的3%NaCl溶液0.95mL小試管內，使豬精液稀釋20倍，并混合均勻。將備好的血細胞計數板用血蓋片將計數室平穩愛好，用小吸管西區稀釋精液，滴一滴于血蓋片邊緣，使其自行流入計數室內，均勻充滿，不得留有氣泡或者溢出于血蓋片之外。

血細胞計數板及其使用方法如下圖：

靜置3min后，在400-600倍顯微鏡下檢查。統計出計數室內四角及中央共5個方格內的精子數。

將所統計出的精子數（Ｘ）代入下列公式即得出每毫升精液所含的精子數（個）。

每毫升原精液精子數= Ｘ×5×10×20×1000

簡化后可為：每毫升原精液精子數= Ｘ×100萬

注：

Ｘ —— 5個中方格內精子數

5  —— 25個中方格（1平方毫米）中精子數

10 —— 1立方毫米中精子數

20 —— 稀釋倍數

1000 —— 1立方厘米（毫升）中原精液精子數

為了減少誤差，必須進行兩次精子數計數。如果誤差大于10%，則應做第三次檢查。取其兩次精子計數不超過10%的數據，求其平均數為確定的精子數。 

血球計數板*度不高，影響因素較多，重復性差。
 

2、儀器精液精子數測定方法

用傳統手工操作來判斷公豬精液的質量已經遠遠滿足不了現代農業的需求，手工操作估算方法更多依托于個人經驗和熟練操作。先進專業的儀器則大大降低了手工操作導致的誤差，提高了母豬受精成功率。

意大利HANNA-MEDI系列便攜式獸用精子密度儀

用儀器直接讀數，取代了人工操作，無需顯微鏡，不需要人工計算，沒有耗材，減少誤差，提高工作效率。 

這款系列擁有先進的光學系統和HANNA** CAL Check™ 儀器校驗功能。
*光學系統是由鎢燈和窄帶干擾濾波器組成，確保每次準確的讀數。
憑借獨特的 CAL Check™ 驗證檢查功能，用戶可以在任何時間，簡單方便驗證儀器的性能。
只能使用意大利HANNA原廠提供的NIST測量曲線標定組進行CAL Check™ 核驗，非Hanna 品牌專用NIST測量曲線標定組會造成內置標準曲線嚴重漂移，甚至會損壞儀器。
所有儀器出廠都經過校準，*大限度地減少了頻繁復核。
比色管是由特殊光學玻璃制作，以獲得*佳效果，并使用*正鎖系統確保了比色管每次都是置于比色槽的相同位置。
比色管是廣口容器設計，更容易添加樣品。

意大利MEDI系列便攜式獸用精子密度計/精液濃度分析儀 ·CAL Check™——允許用戶性能核查 ·BEPS——提醒用戶電池電量低 ·內置計時器——保證統一的測量時間 ·GLP功能——隨時更新、查閱標定數據、日期、標準等信息

CAL Check™ 儀器校驗正確操作步驟：

1、開機后按照CAL CHECK鍵3秒，進入標定模式；
2、放入A標定比色皿，按“ZERO/CFM”鍵，顯示“-0.0-”，校零完成，進入下一步標定流程；
3、放入B標定比色皿，按READ鍵，顯示已知標準值，在規定范圍內，儀器性能符合標準，標定結束。
   

技術參數

^*1mg=1000萬個 

標準配置

主機，定制專用比色皿（2個），專用零點標定液，專用玻璃比色皿清潔布（2塊），取樣器，中英文使用說明書，定制專用儀器攜帶箱