【猪精液密度测量】用先进仪器取代传统血细胞计数板

  正目前猪人工授精已经广泛开展,但一些种公猪站(场)对猪精子密度的测定还采取目测评估方法,生产出来的精液产品质量不稳定,在一定程度上影响了人工受精的效果。传统的通过显微镜观察,采用血细胞计数板检测精子密度方法操作不便,计数受人为因素影响,很多猪场难以操作。因此,采用一种简便、迅速、可靠的密度检查方法就成为当前人工授精技术的迫切需求。  

一、国家标准

2009年国家颁布的《中华人民共和国国家标准种猪常温精液[GB23238-2009]》中规定了猪原精液和常温精液产品的指标和要求。

1、原精液

种猪原精液品质有如下5项指标和要求：

表1  原精液检测指标要求

2、精液产品

种猪精液产品的品质有如下6项指标和要求：

表2  种猪精液产品指标要求

二、精液精子数测定

1、 传统原精液精子数测定方法 

传统原精液精子数量可使用 血球计数板和显微镜 测定。

用血色素微量吸管，准确西区50μL（0.05mL）猪原精液，键入到盛有准确的3%NaCl溶液0.95mL小试管内，使猪精液稀释20倍，并混合均匀。将备好的血细胞计数板用血盖片将计数室平稳爱好，用小吸管西区稀释精液，滴一滴于血盖片边缘，使其自行流入计数室内，均匀充满，不得留有气泡或者溢出于血盖片之外。

血细胞计数板及其使用方法如下图：

静置3min后，在400-600倍显微镜下检查。统计出计数室内四角及中央共5个方格内的精子数。

将所统计出的精子数（Ｘ）代入下列公式即得出每毫升精液所含的精子数（个）。

每毫升原精液精子数= Ｘ×5×10×20×1000

简化后可为：每毫升原精液精子数= Ｘ×100万

注：

Ｘ —— 5个中方格内精子数

5  —— 25个中方格（1平方毫米）中精子数

10 —— 1立方毫米中精子数

20 —— 稀释倍数

1000 —— 1立方厘米（毫升）中原精液精子数

为了减少误差，必须进行两次精子数计数。如果误差大于10%，则应做第三次检查。取其两次精子计数不超过10%的数据，求其平均数为确定的精子数。 

血球计数板*度不高，影响因素较多，重复性差。
 

2、仪器精液精子数测定方法

用传统手工操作来判断公猪精液的质量已经远远满足不了现代农业的需求，手工操作估算方法更多依托于个人经验和熟练操作。先进专业的仪器则大大降低了手工操作导致的误差，提高了母猪受精成功率。

意大利HANNA-MEDI系列便携式兽用精子密度仪

用仪器直接读数，取代了人工操作，无需显微镜，不需要人工计算，没有耗材，减少误差，提高工作效率。 

这款系列拥有先进的光学系统和HANNA** CAL Check™ 仪器校验功能。
*光学系统是由钨灯和窄带干扰滤波器组成，确保每次准确的读数。
凭借独特的 CAL Check™ 验证检查功能，用户可以在任何时间，简单方便验证仪器的性能。
只能使用意大利HANNA原厂提供的NIST测量曲线标定组进行CAL Check™ 核验，非Hanna 品牌专用NIST测量曲线标定组会造成内置标准曲线严重漂移，甚至会损坏仪器。
所有仪器出厂都经过校准，*大限度地减少了频繁复核。
比色管是由特殊光学玻璃制作，以获得*佳效果，并使用*正锁系统确保了比色管每次都是置于比色槽的相同位置。
比色管是广口容器设计，更容易添加样品。

意大利MEDI系列便携式兽用精子密度计/精液浓度分析仪 ·CAL Check™——允许用户性能核查 ·BEPS——提醒用户电池电量低 ·内置计时器——保证统一的测量时间 ·GLP功能——随时更新、查阅标定数据、日期、标准等信息

CAL Check™ 仪器校验正确操作步骤：

1、开机后按照CAL CHECK键3秒，进入标定模式；
2、放入A标定比色皿，按“ZERO/CFM”键，显示“-0.0-”，校零完成，进入下一步标定流程；
3、放入B标定比色皿，按READ键，显示已知标准值，在规定范围内，仪器性能符合标准，标定结束。
   

技术参数

^*1mg=1000万个 

标准配置

主机，定制专用比色皿（2个），专用零点标定液，专用玻璃比色皿清洁布（2块），取样器，中英文使用说明书，定制专用仪器携带箱